厌氧培养箱安装与使用

厌氧培养箱安装

　　1.整机应安放在温差较小、操作方便的位置，应避免阳光直晒和远离采暖设备，放置平稳；

　　2.将混合气瓶、氮气瓶安放平稳，并分别装好减压阀（含压力表），安置在适当位置；

　　3.接上气路并检查气路，为防止漏气，必要时可在各接管处用密封胶粘合；

　　厌氧培养箱使用

　　（一）操作室厌氧环境形成：

　　1.按使用要求放置好必要的附件和器具；

　　2.通电源开照明灯，开温控仪，调节所需温度；

　　3.操作室内放入1000g钯粒（封闭）和500g干燥剂，并放入美兰指示纸（封闭）；

　　4.关紧取样室内外门，并抽真空校验；

　　5.操作室内次置换（氮气置换）：

　　A.把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧

　　B.接通氮气进气路，打开氮气控制阀1，使手套鼓起，关闭阀门1，然后扎紧袋口；

　　6.操作室第二次置换（氮气置换）重复一次充氮过程，取样室先抽真空，并注意随时用脚踏开关开闭排气。如此连续三次氮气置换。

　　7.操作室第四次置换（混合气体置换）：

　　（混合气体配比为N285%、H210%、CO25%）

　　A.调换气路打开混合气阀3进气，充气时取样室先抽真空，并随时用脚踏开关开闭排气；

　　B.关掉混合气体阀3，并打开阀5，使混合气体经过流量计，调整流量计，流量为每分钟10ml左右；

　　C.混合气体重复2-3次转换，经过上述过程，基本形成厌氧环境。

　　8.操作室内打开粑粒除氧剂，接通除氧催化器电源进行催化除氧，一小时后打开美兰指示纸观察其变况，不变色为操作室内达到厌氧环境；

　　9.开紫外线灭菌灯，室内进行灭菌处理，灭菌时间按具体实验自定。

　　（二）菌种的置入和培养：

　　1.检查取样室内门并关紧；

　　2.打开取样室外门，将菌种放入取样室后即关上外门；

　　3.取样室充氮置换三次过程：打开真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打开氮气阀2进气，使指针回复零位，关掉阀2。第二次重复操作一次。第三次操作时，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打开阀4进混合气，使指针回复零位，关掉阀

　　4。取样室充氮置换三次过程结束；

　　4.如选定真空度较低就需要增加置换的次数；

　　5.取样室外门开启、关紧，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）检验；

　　6.厌氧培养箱需要长期连续使用的条件：

　　A.每天在操作室内打开美兰指示纸观察，如不正常就必须重新换气；

　　B.要长期连续输入微量的混合气体，使补进的氮气能和微量的氧结合通过催化吸收，保证室内厌氧状态，补入混合气流量选定为每分钟10ml左右；

　　C.连续培养运行一天，更换一次除氧剂和干燥剂。

　　D.操作室内温度可任意选择和控制。

　　7.混合气瓶、氮气瓶输出压力调整：调节减压阀，使输出压力0.1Mpa左右。

厌氧培养箱使用步骤

　　厌氧培养箱是一种在无氧环境下进行细菌培养及操作的装置,可培养难生长的厌氧升物,又能避免以往厌氧生物在大气操作时接触氧气而死亡的危险 。广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产，已经成为上述领域实验室常用的仪器。我们在使用如何正确规范的操作厌氧培养箱呢，下面就做简单介绍

一、操作形成厌氧环境

　　1、按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室内放入二个无毒塑料袋。 
　　2、通电源开照明灯，开控温仪，调节所需温度及安全温度。
　　3、操作室内放入1000g钯粒（封闭）和500g干燥剂，并放入美兰指示剂（封闭）。 
　　4、 关紧取样室内外门，并抽真空校验。
　　5、操作室内次置换（氮气置换）： 
　　（1）先用橡皮管插入操作室内进气口，另一头插入塑料袋。
　　（2）接通氮气进气路，打开氮气控制阀，使二只塑料袋充足氮气，然后扎紧袋口。 
　　（3）把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧。
　　（4）把塑料袋内氮气渐渐地放于操作室内，至全部放出。 
　　6、操作室第二次置换（氮气置换）重复一次充氮过程，并注意随时用脚踏开关开闭排气。
　　7、操作室第三次置换（混合气体置换）： 
　　（混合气体配比为：N2 85%；H2 10%；CO2 5%）。
　　（1）调换气路打开混合气道通阀门进气，充气时要随时脚踏开关开闭排气。 
　　（2）混合气充满塑料袋后，关掉混合气直通阀（三通阀），使混合气经过流量计输入操作并调整流量计，流量为每分钟10毫升左右。 
　　（3）把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内。 
　　（4）通过三次换气后，操作室内气体含氧量已处于极微量状态。
　　8、操作室内打开钯粒除氧剂，接通除氧催化器电源进行催化除氧，一小时后打开美兰指示剂（美兰安瓶）观察其变况，不变色为操作室内达到厌氧环境。 
　　9、开紫外线灭菌灯，室内进行灭菌处理。灭菌时间自定。 

二、菌种的置入和培养

　　1、检查取样室内门并关紧之。 
　　2、打开取样室外门，将菌种放入取样室后即关上外门。
　　3、 取样室充氮置换三次过程：先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停，然后人工打开氮气阀门进气，使指针回复零位后进行下次操作。 
　　4、如选定真空度较低就需要增加置换的次数。
　　5、取样室内外门开启，关紧要抽低真空度100毫米汞柱（13 Kpa）检验及帮助操作。 
　　6、厌氧培养箱需要长期连续使用的条件：
　　（1）每天在操作室内打开美兰指示剂观察，正常情况下使用。如不正常就必须重新换气。 
　　（2）要长期连续输入微量的混合气体，使补进的氢气能和微量的氧结合通过催化吸收，保证了室内厌氧状态，补入混合气流量选定为每分钟10毫升左右。 
　　（3）连续培养运行一天，更换一次除氧剂和干燥剂。 
　　7、接种棒灭菌器的应用：
　　（1）随时用镍铬电热丝使电极短路而变赤热以进行杀菌（接种棒）。 
　　（2）熔蜡处可直接放上，试管封蜡口旋转熔蜡。
　　8、操作室里的培养箱内的温度不可任意选择和控制。 
　　9、调整混氮气瓶、合气瓶输出压力：调节减压阀，使输出压力为0.1Mpa左右。