几种粗纤维含量测定方法的比较

由于膳食纤维与人体健康的关系日益受到重视，迫切需要食物中膳食纤维各成分的数据，这对测定食物中膳食纤维的方法学研究提出了要求。总结膳食纤维分析方法，其原理主要是依据膳食纤维可进行的化学反应和酶反应，膳食纤维分析的重要方法包括非酶重量法如粗纤维、中性洗涤剂纤维和酸性洗涤剂纤维的分析方法；酶重量方法主要有AOAC提供的总纤维、可溶纤维和不溶纤维的测定方法；酶化学方法主要有酶显色法、酶气相色谱法、酶高压液相色谱法，以及欧洲相应机构对于膳食纤维测定的各种研究和应用方法。

　　我国的不同部门根据不同时期膳食纤维分析方法的改进，发布了系列标准方法。早的标准是我国部1985发布GB5009. 10-85（食品中粗纤维的测方法），该方法原理是在硫酸作用下，样品中的糖、淀粉、果胶质和半纤维素经水解除去后，再用碱处理，除去蛋白质及脂肪酸，遗留的残渣为粗纤维。如其中含有不溶于酸碱的杂质，可灰化后除去。该标准用于植物类食品中粗纤维含的测定。以该分析方法为基础，标准局1985年发布了GB5515-85粮食、油料检验一粗纤维素测定法，用于指导商品粮食中粗纤维素的测定。商业部1987年出台了GB8310-87茶粗纤维测定，用于茶叶中粗纤维含的测定。1989年出台GB10469-89水果、蔬菜粗纤维的测定方法，用于水果、蔬菜产品粗纤维含量的测定。

　　粗纤维测定法是Einhof在1801-1809年建立的，又称消化方法。其中的木质素在碱消化过程中大量溶解，半纤维素在酸、碱消化过程中均大量溶解。该法可回收5096-80%的纤维素，20%的半纤维素，1096-50%的木质素。该方法不能*回收任何化学成分。

　　GB9822-88（谷物不溶性膳食纤维测定法）是商业部1988年批准的用于谷物不溶性膳食纤维的测定，该方法原理是谷物样品经中性洗涤剂溶液浸煮，残渣用热水充分洗涤后，加入a一淀粉酶溶液以分解残留的结合态淀粉，再用水、丙酮洗涤，烘干即得不溶性膳食纤维。GB12394-90（食品中不溶性膳食纤维的测定方法），部1990年发布，是我国目前普遍使用的方法。该标准规定了食物中不溶性膳食纤维的中性洗涤剂测定方法，适用于各类植物性食物和含有植物性食物的混合食物中不溶性膳食纤维的测定，其小检出限为O.lmg.该方法原理是在中性洗涤剂（主要成分通常是十二烷基硫酸钠）的消化作用，样品中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶解除去，不能消化的残渣为不溶性膳食纤维，主要包括纤维素、半纤维素、木质素、角质和二氧化硅等，并包括不溶性灰分。该法测得的纤维称为中性洗涤剂纤维。若采用酸性洗涤剂（主要成分是十六烷三甲基澳化按）对样品进行消化，则测得的纤维称为酸性洗涤剂纤维。中性洗涤纤维素是对总的植物细胞壁含量的估计，主要包括纤维素、半纤维素和木质素。酸性洗涤纤维是对纤维素和木质素含量的估计，根据二者的差值可估测饲料中半纤维素含。粗纤维中纤维素、半纤维素和木质素的比例常用于指导猪饲料原料的配制。

　　与粗纤维测定法相比，洗涤剂测定法可以回收全部的纤维素、不可溶性半纤维素、木质素。但洗涤剂法只能测定不可溶性膳食纤维，不能测定可溶性膳食纤维。随着对膳食纤维研究的升级，以及越来越多的膳食纤维品种的出现，以上传统的非酶一重量法已表现出明显的不足。

　　酶一重量法是20世纪$0年代发展起来的，现已成为AOAC认可的方法。它是模拟膳食纤维在人消化道里进行的天然化学反应进行检测。该法可分析食品中的总膳食纤维（DF）、可溶性膳食纤维（SDF）和不溶膳食纤维（IDF）。其分析原理是分别用热稳定的a一淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖昔酶进行酶解消化样品以去除蛋白质和淀粉。DF的测定是先酶解，然后用乙醉沉淀，将过虑的DF残渣用乙醉和丙酮冲洗，干燥后称重。IDF和SDF是在样品酶解后即刻将IDF过滤，过涟后的残渣用热水冲洗，经干燥后称重。SDF是将上述滤出液用乙醉沉淀，将滤渣千燥、称重。后DF, IDF和SDF的含通过蛋白质和灰分含进行校正。

　　该方法适于一般食物如谷类、蔬菜等和保健食品的测定。是目前应用广泛的方法。但是该法测定总膳食纤维是根据膳食纤维不溶于酶解液，从4倍体积的9596乙醉混合液分离出来的，一些可溶性膳食纤维（聚合度DP在3-12）如菊糖、聚葡萄糖、抗性糊精、抗性寡糖等低分子量膳食纤维可部分或全部溶解在？8%的乙醉溶液里，不能用该法测出，这样就导致结果偏低。

  　酶化学法也是AOAC认可的膳食纤维分析方法，我国对该方法的研究还很有限，该方法是从化学分析入手，通过测定每一具体组成成分的含量得其总S o此方法可测定总膳食纤维、中性糖、糖醛酸的残留部分以及木质素。此方法系用酶解方法将淀粉去除，然后用乙醉使可溶性的多聚体沉淀出来，再用硫酸水解此沉淀物中的不可溶多糖使其中的中性糖释放出来。此中性糖由气相色谱定分析。酸性水解液中的糖醛酸用比色法定量检测，木质素则用重法测定。后中性糖+糖醛酸+木质素二DF.该方法可定量测定其中每一种中性糖和总的酸性物质（糖醛酸），还可单独测定木质素，但因受仪器设备制约，因而不适用于常规的膳食纤维分析。

　　仪器法是近几年兴起的方法，主要是通过粗纤维测定仪进行测定。杭州聚同系列粗纤维测定仪是依据目前常用的酸碱消煮法消煮样品，并进行重量测定来得到试样的粗纤维含量的仪器。粗纤维测定仪采用浓度准确的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醇除去可溶物质，经高温灼烧后扣除矿物质的量，所含量称粗纤维。它不是一个确切的化学实体，只是在*强制规定的条件下测出的概略成份，其中以纤维素为主，还有少量半纤维素和木质素。

　　总之，以上膳食纤维分析方法都有各自的优缺点，用目前任何一种膳食纤维测定方法均不能测定食品中的所有膳食纤维含量。