山东CO2培养箱HH.CP-TW二氧化碳箱160升

山东CO2培养箱HH.CP-TW二氧化碳箱160升何用二氧化碳培养箱进行细胞复苏、传代及冻存实验一  复苏 传代

（1） 准备

   无菌超净台，酒精灯，75%酒精喷壶，二氧化碳培养箱，37℃水浴锅，离心机；培养瓶，含10%胎牛血清的*培养基和基础培养基以及PBS磷酸缓冲液（提前放置超净台使平衡到室温），无菌工作服（白大褂），口罩，手套，记号笔

（2） 步骤

   1.穿好无菌工作服，带上口罩和手套，快速从液氮里取出冻存管，快速放进37℃水浴锅缓慢摇晃使细胞解冻，注意冻存管的封口膜不要破裂，防止污染。

   2.解冻后用纸擦干冻存管表面的水滴，酒精喷壶喷洒适量75%酒精消毒冻存管封口处。

   3.开超净台，点燃酒精灯燃烧片刻后（可提前准备），冻存管放超净台，换新手套，小心打开冻存管，避免污染，无菌吸管将1ml细胞全部吸出至5ml无菌EP管，补加9ml基础培养基稀释，1000rpm，离心5min使细胞沉淀，弃上清。

   4.加入新鲜配制的含10%血清的培养基4ml，轻轻混匀，用吸管将细胞移至25T培养瓶。

   5.平躺放置培养瓶，8字形混匀后，置于37℃，5%二氧化碳培养箱培养。

   6.培养24小时后，显微镜观察细胞（贴壁细胞）贴壁后，小心更换培养基，根据不同细胞的生长状态进行传代培养，培养瓶上标记：操作者，时间，细胞类型。

   7.有的实验员的培养基会加入抗生素防止细胞污染，但是这对于掌握细胞培养是非常不利的，不加抗生素培养细胞更能提醒实验者无菌操作的意识。一旦细胞出现污染，易于发现，一旦发现污染的细胞应立刻煮沸丢弃，以免污染同实验室其他细胞。

山东CO2培养箱HH.CP-TW二氧化碳箱160升技术参数:

二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境，培养箱要求稳定的温度（37°C）、稳定的CO2水平（5%）、恒定的酸碱度（pH值：7.2-7.4）、较高的相对饱和湿度（95%），来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。
1、气套式二氧化碳培养箱：
对于使用者来说气套式二氧化碳培养箱设计更简单化。
它的加热系统是通过箱体内的加热器直接对箱内气体进行加热的。
气套式培养箱加热速度快，有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养
气套式二氧化碳培养箱在设计箱门频繁开关导致温度经常性改变的情况下能够迅速恢复箱体内的温度稳定。
2、水套式二氧化碳培养箱：
水套式二氧化碳培养箱是通过一个独立的热水间隔间，包围内部的箱体来维持温度恒定的。
由于水是绝热物质，当出现断电情况，水套式二氧化碳培养箱可更长久保持培养内温度准确性和稳定性。
水套式需要对水箱进行加水，清空和清洗，并需要经常对水箱进行监控。
如果用户需要快速进行培养建议选择气套式二氧化碳培养箱，如用户实验环境有用电限制或出现断电的情况建议选择水套式二氧化碳培养箱。