详细介绍
品牌 | JTONE/聚同 | 控温范围 | 0~50℃ |
---|---|---|---|
容量规格 | 160升 | 温度均匀性 | 1℃ |
价格区间 | 1千-5千 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,生物产业,农业 |
长春水套式CO2培养箱HH.CP-TW细胞培养
包括营养液、胰酶、清等。
清特别重要。清必须贮存于 –20℃,如果一次无法用完一瓶,可将 40~50ml 分装于无菌酸处理瓶中,甚至置青霉素瓶保存。一般厂商提供的清为无菌,不需再无菌过滤。若发现清有许多悬浮物,则可将清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤清。(一般情况下不影响细胞培养)
瓶装清一定要逐步解冻: 4℃ 冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
热灭活是指 56℃,30 分钟加热已*解冻之清。水浴锅升到 56℃后,将清放入,待温度升高到 56℃ 后计时,一般 5 分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响清之品质。注意更换新清(包括不同批次)对细胞的影响。
7、无菌意识要强
实验进行前,超净台以紫外灯照射 30 分钟灭菌,以 70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以 70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。
无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以 70% 乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。
小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约 45° 角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
长春水套式CO2培养箱HH.CP-TW细胞培养技术参数:
型号 | 容积L | 控温范围℃ | 控温精度℃ | 湿度范围℃ | 工作室尺寸mm | 外形尺寸mm |
HWS-70B | 70 | 0~50 | 1 | 30-95% ±2% | 350x400x500 | 540x540x1100 |
HWS-70BC | ||||||
HWS-150B | 150 | 400x500x750 | 600x640x1340 | |||
HWS-150BC | ||||||
HWS-250B | 250 | 500x550x950 | 660x690x1540 | |||
HWS-250BC | ||||||
HWS-350B | 350 | 550x600x1100 | 730x740x1690 | |||
HWS-350BC | ||||||
备注 | 不锈钢圆弧内胆、内置不锈钢玻璃门。B型为标准型配置,智能液晶控制器。BC为功能型配置,液晶显示3D段程序控制器,配有计算机远程控制RS485接口。 |
准备
细胞冻存液(20%清、10%DMSO、70%基础培养液),梯度降温盒
(2) 步骤
1.选取活力好,密度约70%细胞用于冻存,此时细胞处于对数生长期,适合用于冻存。
2 .细胞吹打或者胰酶消化后,转移至无菌EP管,1000rpm里面5min。
3.弃上清,加入新鲜配制的细胞冻存液,25T细胞可以加入2ml细胞冻存液,分装2个冻存管,细胞密度为5*106-1*107个每ml。
4.做好标记,放入梯度降温盒(提前平衡至室温)。
5.将梯度降温盒放入-80℃冰箱过夜,第二天取出冻存管,快速放入液氮保存。
氧化碳培养箱是进行细胞培养的必要设备,那么在培养细胞时有哪些经验是我们可以借鉴的呢?下面让我们一起来看一下。
1、启蒙老师的重要性
一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置;灭菌处理程序;开盖手法;细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在*次的时候就要重视。
2、像养孩子一样养细胞
细胞真的很脆弱,每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。
3、好细胞要及时保种
细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。有一次细胞污染了,全军覆没。当时可后悔没有保种。
4、每种细胞都有自己的特性,要区别对待。
细胞跟人一样,不同的细胞,培养特性是不一样的。培养过程中要细细体会。不同细胞株使用不同的培养基和清。
如平滑肌细胞很活跃,喜欢热闹,2~3 天就好多人口,而且不太爱吃喝,真是养的孩子了。内皮细胞和平滑肌细胞性格相近,不过它很不讲,也很邋遢,里面有很多分泌屋,要经常换洗才行。RAW264.7 细胞也很开朗,而且很能吃,要经常喂它,头疼的是细胞很容易活化,培养它的瓶子和环境没有内毒素才好。
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